抑菌试验即检测一种具有杀菌或抑制菌体活性的药物,观察其在体外能抑制细菌生长的效能的试验。通过抑菌试验还可以测定使用该种药物来抑制菌群的生长所需要达到的最低使用浓度。这是抗菌活性药物最基本的药效学数据。
抑菌试验方法:常量肉汤稀释法
A、抗菌药物贮存液制备
1.1.1.抗菌药物贮存液制备 抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。抗菌药物直接购自厂商或相关机构。所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。例如:需配制100 ml浓度为1280μg/ml的抗生素贮存液,所用抗生素为粉剂,其药物的有效力为750μg/mg。用分析天平精准称取抗生素粉剂的量为182.6 mg。根据公式计算所需稀释剂用量为:(182.6 mg×750μg/ml)/1280μg/ml=107.0ml,然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表5。配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-60℃以下环境,保存期不超过6个月。
B、药敏试验用抗菌药物浓度范围
1.1.2.药敏试验用抗菌药物浓度范围 根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准,药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值,特殊情况例外。
C、培养基
1.1.3. 培养基 NCCLS推荐使用Mueller-Hinton(MH)肉汤,pH7.2~7.4。需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时,应在肉汤中加入2%(W/V)氯化钠,按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤,肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。
D、接种物的制备
1.1.4.接种物的制备 有2种方法配制接种物,一是细菌生长方法,用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个,接种于4-5ml的水解酪蛋白(MH)肉汤中,35℃孵育2-6h。增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准,约含1~2×108CFU/ml。二是直接菌落悬液配制法,对某些苛养菌,如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株,推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5麦氏比浊标准的菌悬液。用MH肉汤将上述菌悬液进行1∶100稀释后备用。注意应在15分钟内接种完配制好的接种物,并取一份接种物在非选择性琼脂平板上传代培养,以检查接种物纯度。
抑菌试验标准举例
1、T/TIC 008-2023 抑菌液
2、T/TIC 009-2023 抑菌凝胶
3、T/ZZB 2698-2022 抑菌型洗衣皂
4、T/BYXT 003.1-2022 稀土抗抑菌基础材料 第1部分:载锌抗抑菌粉
5、T/BYXT 008-2022 稀土抗抑菌手套
6、T/BYXT 006-2022 稀土抗抑菌口罩
7、T/ZZB 2291-2021 泡沫抑菌洗手液
8、T/BYXT 003.3-2023 稀土抗抑菌基础材料 第3部分:复合抗抑菌液
9、T/BYXT 003.2-2023 稀土抗抑菌基础材料 第2部分:复合抗抑菌粉
10、T/BYXT 031-2023 稀土抗抑菌家具
11、T/CSATC 12-2022 天然抑菌蚕丝被
抑菌试验范围
青霉素、洗手液、牙膏、防腐剂、口服液、牙刷、日化用品、涂层、不锈钢、消毒剂、香皂、沐浴露等。
抑菌试验时间周期
到样后7-10个工作日(可加急),根据样品及其检测项目/方法会有所变动,具体需咨询工程师。
抑菌试验流程
1、沟通需求(在线或电话咨询);
2、寄样(邮寄样品支持上门取样);
3、报价(根据检测的复杂程度进行报价);
4、签约(签订合同和保密协议);
5、完成检测(检测周期会根据样品及其检测项目/方法会有所变动,出具检测报告,售后服务)。
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