左旋肉碱又称L-肉毒碱、维生素BT,化学式是C7H15NO3,化学名称为(R)-3-羧基-2-羟基-N,N,N-三甲基丙铵氢氧化物内盐,代表药物有左卡尼汀。是一种促使脂肪转化为能量的类氨基酸,纯品为白色晶状体或白色透明细粉,极易溶于水、乙醇、甲醇,微溶于丙酮,不溶于苯、三氯甲烷、乙酸乙酯。左旋肉碱极易吸潮,具有较好的溶水性和吸水性,能耐200℃以上的高温。红色肉类是左旋肉碱的主要来源,人体自身也可合成来满足生理需要。不是真正意义上的维生素,只是一种类似维生素的物质。
关于左旋肉碱,北京清析技术研究院可提供左旋肉碱含量、水分、灰分、总氮、还原糖、吸湿性、微生物指标、荧光亮度、重金属含量、总酸、蛋白质含量、酯化度、油分、氨基酸含量、总磷含量、总铜含量、维生素含量、嗅觉、口感、外观等检测项目。同时,北京清析技术研究院可对普通左旋肉碱、微生物发酵左旋肉碱、酯化左旋肉碱、盐基左旋肉碱、液态左旋肉碱、固态左旋肉碱、普通食品级左旋肉碱、医药级左旋肉碱、化妆品级左旋肉碱、工业级左旋肉碱、天然左旋肉碱、合成左旋肉碱、有机左旋肉碱、无机左旋肉碱、脂肪酸左旋肉碱、肌肉型左旋肉碱、心脏型左旋肉碱、神经型左旋肉碱、肝脏型左旋肉碱等进行检测。
左旋肉碱检测方法
高效液相色谱的方法提要:试样中的左旋肉碱经稀盐酸提取,皂化后使结合态的左旋肉碱游离出来。阳离子交换固相萃取柱净化,在氯甲酸丁酯、三乙胺的催化下与L-丙酰胺-β-萘胺发生取代反应,生成紫外吸收较强的化合物,供配有二极管阵列检测器或紫外检测器的高效液相色谱仪测定,外标法定量。
1、样品处理
提取:乳粉、液体饮料类(左旋肉碱含量小于等于1000 mg/kg样品):称取5 g(准确到0.01 g)于50 mL容量瓶中,加入20 mL 0.1 mol/L盐酸溶液,涡旋振荡1 min,超声5 min溶解样品,加入5 mL 1mol/L氢氧化钾溶液涡旋混合,60℃水浴皂化30 min,冷却至室温,加入5 mL 1 mol/L盐酸溶液,涡旋混匀1 min,以0.1 mol/L盐酸溶液定容至50 mL.取1 mL提取液于15 mL试管中,加入9 mL乙腈,涡旋混匀1 min后取部分于5 mL离心管中,16000 r/min离心5 min,所得上清液待净化。左旋肉碱含量大于1000 mg/kg的样品先稀释后再提取。固体饮料类用水溶解并稀释至合适含量后提取。
净化:取1 mL待净化溶液于活化好的阳离子固相萃取柱中,以1滴/秒的速度过柱,用3 mL 10 mmol/L的盐酸水溶液淋洗,弃去淋洗液,真空抽干1 min,用2 mL 4%氨水甲醇溶液洗脱,收集洗脱液于15 mL离心管中,40℃下氮气吹干,所得残渣待衍生。
衍生:在残渣中加入0.5 mL衍生试剂(0.45 g/100 mL L-丙酰胺-β-萘胺的乙腈溶液),超声1 min溶解残渣并混匀,再依次加入0.5 mL催化剂Ⅰ(0.50 g/100 mL三乙胺的三氯甲烷溶液)和0.5 mL催化剂Ⅱ(0.50 g/100 mL氯甲酸丁酯的三氯甲烷溶液),漩涡混匀3 min,室温下静置反应30 min后,加入1 mL 50 mmol/L碳酸氢钠水溶液,漩涡混匀3 min终止反应。4000 r/min离心5 min,取上层水相过0.22 μm滤膜,供液相色谱测定,测定需在12 h内完成。
测定步骤:分别吸取25 μL、50 μL、100 μL、500 μL、1000 μL左旋肉碱标准工作液(10.0 μg/mL)于离心管中进行衍生。所得左旋肉碱衍生产物标准系列浓度为0.25 μg/mL、0.50 μg/mL、1 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL,在上述色谱条件下测定标准工作溶液和样液,外标法定量。左旋肉碱衍生产物参考保留时间为3.8 min。空白试验除不加试样外,均按上述操作步骤进行。
2、计算:试样中左旋肉碱的含量利用数据处理系统或按照下式计算(计算结果需将空白值扣除):
式中:X=(C*n*V*1000)/(m*1000)
X——试样中待测物的浓度,单位为毫克每千克(mg/kg);
c——试样终溶液中待测物的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);
n——稀释倍数;
V——样液最终定容体积,单位为毫升(mL);
m——试样终溶液代表的试样量,单位为克(g)。
左旋肉碱检测标准
1、T/ZZB 0683-2018 左旋肉碱富马酸盐
2、T/ZZB 0682-2018 乙酰左旋肉碱盐酸盐
3、NY/T 1028-2006 饲料添加剂 左旋肉碱
4、T/CASME 721-2023 左旋肉碱富马酸盐
5、T/CASME 720-2023 乙酰左旋肉碱盐酸盐
6、T/ZZB 0684-2018 食品营养强化剂 左旋肉碱(L-肉碱)
7、GB 29989-2013 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定
8、GB 1903.13-2016 食品安全国家标准 食品营养强化剂 左旋肉碱(L-肉碱)
9、T/SATA 040-2023 食品中胆碱和左旋肉碱的测定 液相色谱-串联质谱法
10、SN/T 5146-2019 出口食品中左旋肉碱的测定 高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱法
以上就是关于左旋肉碱检测的介绍,北京清析技术研究院提供分析、检测、测试、鉴定、研发等技术服务,已获得CMA、CNAS等资质证书。总院位于北京,在上海、广州、深圳、合肥、南京、成都、武汉等地区设立27家分院,工程师一对一咨询,寄样或上门任您选择,为您提供便利的检测服务。