蜡样芽孢杆菌又称仙人掌杆菌,是一种革兰氏阳性菌,β溶血性的杆状细菌 。经常在土壤和食物中被发现,有些菌株会引起食物中毒,例如"炒饭综合症"(Fried Rice Syndrome);另外一些菌株则对其他动物有益。蜡样芽孢杆菌是兼性厌氧性。与其他芽孢杆菌相同,它会产生防御性的内芽孢。它的致病因子包括施普善(cereolysin)和磷脂酶C(Phospholipase C)。
关于蜡样芽孢杆菌,北京清析技术研究院可提供菌落计数、毒素检测、基因检测、存活性检测、分离及耐药性分析、小白鼠毒力测定、抑菌活性测定、分离鉴定测定、菌株鉴定、菌落形态、产气情况、耐热性等检测项目。同时,北京清析技术研究院可对变质食品,肉制品,奶粉,食品添加剂,牛奶,食醋,蛋白酶,婴幼儿奶粉和米粉,配方乳粉,腐乳,湿粉类制品等进行蜡样芽孢杆菌的检测。
国标检测方法
蜡样芽孢杆菌国标检测方法主要采用了生物学检测和分子生物学检测方法。生物学检测主要使用平板计数法和过滤膜法,分子生物学检测主要使用聚合酶链式反应法(PCR法)和实时荧光定量PCR法(qPCR法)。
1. 样品选择
需要检测的样品包括:发酵食品、膳食补充剂、调味品、果蔬制品、肉制品和乳制品等。
2. 样品制备
样品制备前应先进行预处理。首先采样应在保持样品原有状态的基础上进行。对于固体样品,应采用加热处理或浸泡法进行分离;对于液体样品,应使用过滤方法或离心沉淀法进行分离。
3. 平板计数法
平板计数法是指直接将样品加入含有富含营养物质的寒天平板中,将平板培养在适宜的环境中,形成菌落后进行计数。整个操作过程需要消毒操作标本及工具,取样后用无菌吸管挤压或邀约样本,点样于寒天平板上,用无菌毛细管在菌液上滴蒸馏水,之后在恰当条件下培养。
4. 过滤膜法
过滤膜法将膜片放入模具上,加入样品后进行过滤,将膜片放入含营养物质的寒天平板中,使其形成菌落后,进行计数。操作过程中需要对膜片进行密封操作以避免空气污染。
5. PCR法
PCR法是指从样品中提取DNA,并使用特定引物进行扩增,在扩增过程中计量目的DNA的含量。PCR方法的核心技术是产生大量DNA分子复制,以此来检测目标DNA。
6. qPCR法
qPCR法是指通过PCR法产生信息荧光信号,以定量检测目标DNA的含量。qPCR法和PCR法类似,都是通过DNA扩增并检测扩增产物来判断样品是否含有目标DNA。
检测标准
1、GB/T 26427-2010 饲料中蜡样芽孢杆菌的检测
2、DB51/T 2266-2016 蜡样芽孢杆菌防控板栗炭疽病技术规范
3、SN/T 3932-2014 出口食品中蜡样芽孢杆菌快速检测方法 实时荧光定量PCR法
4、DB22/T 2692-2017 饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌检测 双重微滴数字PCR法
5、GB 4789.14-2014 食品安全国家标准 食品微生物学检验 蜡样芽孢杆菌检验
6、SN/T 3064.9-2011 国境口岸蝇类、蜚蠊携带重要病原体检测方法.第9部分:蜡样芽孢杆菌
7、DIN 10198 E:2021-08 牛奶的微生物检验 推测的蜡样芽孢杆菌的测定 37℃菌落计数技术