大肠菌群检测，菌落总数检测

大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胚杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。

大肠菌群分布较广，在恒温动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于恒温动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。

关于大肠菌群，北京清析技术研究院可提供菌落总数、大肠菌群计数、大肠杆菌计数、大肠菌群总数、大肠杆菌、肠球菌、菌落总数、肠道致病菌、粪链球菌、肠道菌群平衡、埃希氏菌、肠道菌群多样性等检测项目。同时，北京清析技术研究院可对大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌、韵埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、魔雷伯氏菌属和肠杆菌属等进行检测。

检测方法

1）检测器材

（1）培养基 乳糖胆盐发酵管，乳糖发酵管，伊红美蓝琼脂培养基（EMB）。

（2）试剂 革兰染色液等。

（3）器材 平皿，试管，发酵管，吸管，三角瓶，广口瓶，均质器或乳钵，培养箱，恒温水浴锅等。

2）检测步骤

1.采样及稀释

（1）按无菌操作法将检样25g（或25mL）放于含有225mL无菌水的三角瓶中（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。固体检样用无菌均质器，以8000～10000r/min的速度离心1min，做成1：10的稀释液。

（2）用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1Ml，注入含有9mL无菌水的试管内，振摇混匀，做成1：100的稀释液，换用1支lmL灭菌吸管，按上述操作依次作l0倍系列稀释液。

（3）根据食品的卫生要求或对检验样品污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释度接种3管。也可直接用样品接种。

2.乳糖初发酵试验

即通常所说的假定试验。其目的在于检查样品中有无发酵乳糖产生气体的细菌。将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1mL以上者，用双倍乳糖胆盐发酵管；lmL及1mL以下者，用单倍乳糖胆盐发酵管。每一个稀释度接种3管，置36±1℃温箱内，培养24±2h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。

3.分离培养

将产气的发酵管分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板，置36±1℃温箱内培养18～24h，然后观察菌落形态并作革兰氏染色、镜检并作复发酵试验。

4.乳糖复发酵试验

即通常所说的证实试验，其目的在于证明经乳糖初发酵试验呈阳性反应的试管内分离到的革兰阴性无芽胞杆菌，确能发酵乳糖产生气体。在上述选择性EMB培养基上，挑取可疑的大肠菌群菌落1～2个进行革兰染色，同时接种乳糖发酵管，置36±l℃温箱内培养24±2小时，观察产气情况。凡乳糖发酵管产气，革兰染色为阴性反应的无芽胞杆菌，即报告为大肠菌群阳性；凡乳糖发酵管不产气或革兰染色为阳性，则报告为大肠菌群阴性。

检测标准

1、SN/T 3924-2014 出口贝类中大肠菌群、粪大肠菌群检测方法

2、HJ 755-2015 水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定 纸片快速法

3、SN/T 0169-2010 进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法 

4、DB23/T 3312-2022 水质总大肠菌群、粪大肠菌群和细菌总数监测技术规范

5、AS 4276.5:2019 水微生物学 方法 5：大肠菌群、大肠杆菌和耐热大肠菌群 膜过滤法

6、DB21/T 2368-2014 海水中总大肠菌群和粪大肠菌群快速测定 酶底物法

7、DB12/T 956-2020 奶牛场粪污中总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法

8、HJ 1001-2018 水质 总大肠菌群的测定 、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法

以上就是关于大肠菌群检测的介绍，北京清析技术研究院提供分析、检测、测试、鉴定、研发等技术服务，已获得CMA、CNAS等资质证书。总院位于北京，在上海、广州、深圳、合肥、南京、成都、武汉等地区设立27家分院，工程师一对一咨询，寄样或上门任您选择，为您提供便利的检测服务。