北京清析技术研究院
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线粒体膜电位MMP检测机构

线粒体膜电位(MMP)是线粒体内膜两侧的电位差。线粒体是动植物细胞中生成ATP的主要场所,这一过程对于细胞能量转换和维持细胞正常生理功能至关重要。在呼吸氧化过程中,线粒体将产生的能量以电化学势能的形式储存于内膜,这种势能在内膜两侧造成质子及其他离子浓度的不对称分布,从而形成线粒体膜电位。正常的MMP对于维持线粒体的氧化磷酸化过程和产生三磷酸腺苷(ATP)是必要的,这对于细胞的能量需求至关重要。MMP的稳定性有利于维持细胞的正常生理功能,而在细胞凋亡过程中,MMP的下降是一个早期的病理变化。


关于线粒体膜电位,北京清析技术研究院可提供波长检测,荧光检测,定量检测,电位变化检测,酶标仪检测等检测项目。同时,北京清析技术研究院可对组织样本线粒体膜电位,细胞凋亡线粒体膜电位,组织细胞线粒体膜电位等进行检测。


检测方法

线粒体膜电位(MMP)的检测方法主要包括:

1、荧光染料探针方法

使用亲脂阳离子荧光染料,如罗丹明123(Rhod123)、四甲基罗丹明甲酯(TMRM)、四甲基罗丹明乙酯(TMRE)和四氯四乙基苯并咪唑羰花菁碘化物(JC-1)等。这些染料在线粒体内积累,其荧光特性可反映线粒体膜电位的变化。例如,JC-1在正常线粒体中形成聚合物发出红色荧光,在线粒体去极化时以单体形式存在,发出绿色荧光。

a. Rhodamine123染色法 

Rhodamine123是一种融合素,可在线粒体膜电位较高时进入线粒体并累积,可通过荧光显微镜观察到其荧光信号强度。由于Rhodamine123只在线粒体内累积,因此通过测量线粒体内的荧光信号强度可以间接反映线粒体膜电位的高低。 

b. JC-1染色法 

JC-1是一种荧光染料,具有两种不同的荧光状态:单体态(绿色荧光)和聚集态(红色荧光)。在高线粒体膜电位时,JC-1会聚集在线粒体内,形成红色荧光信号;而在低线粒体膜电位时,JC-1则以单体态存在,发出绿色荧光信号。通过测量红/绿荧光强度比值可以间接反映线粒体膜电位的变化。

c. TMRE染色法 

TMRE是一种富里酯荧光染料,可与线粒体膜电位呈正相关。线粒体膜电位越高,TMRE的荧光信号越强,可以通过流式细胞术观察到其荧光信号强度的变化。由于TMRE染料稳定性好,无毒性,并且可以直接与膜电位相关,因此被广泛应用于线粒体膜电位的检测。 

2、流式细胞术

结合荧光染料探针,流式细胞术可以实现对单个细胞的线粒体膜电位进行定量分析。

3、CCCP处理

CCCP是一种可逆的质子梯度解偶联剂,可通过降低线粒体内膜的电化学电位,导致线粒体快速去极化,用作阳性对照。

检测过程通常包括细胞铺板、设置阳性对照、JC-1染色、离心和水洗等步骤。其中,细胞铺板和设置阳性对照是为了保证实验的准确性和可靠性。


检测标准

1、T/QGCML 2330-2023 线粒体膜电位检测技术规范


以上就是关于线粒体膜电位检测的介绍,北京清析技术研究院提供分析、检测、测试、鉴定、研发等技术服务,已获得CMA、CNAS等资质证书。总院位于北京,在上海、广州、深圳、合肥、南京、成都、武汉等地区设立27家分院,工程师一对一咨询,寄样或上门任您选择,为您提供便利的检测服务。

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