胆碱酯酶活性测定，胆碱酯酶检测cma资质

胆碱酯酶是一类糖蛋白，以多种同工酶形式存在于体内。一般可分为真性胆碱酯酶和假性胆碱脂酶。真性胆碱酯酶也称乙酰胆碱酯酶，主要存在于胆碱能神经末梢突触间隙，特别是运动神经终板突触后膜的皱摺中聚集较多；也存在于胆碱能神经元内和红细胞中。此酶对于生理浓度的Ach作用强，特异性也较高。一个酶分子可水解3×10分子Ach，一般常简称为胆碱酯酶。假性胆碱酯酶广泛存在于神经胶质细胞、血浆、肝、肾、肠中。对Ach的特异性较低，假性胆碱酯酶可水解其他胆碱酯类，如琥珀胆碱。

基本性质

胆碱酯酶蛋白分子表面的活性中心有两个能与乙酰胆碱结合的部位，即带负电荷的阴离子部位和酯解部位。酯解部位含有一个由丝氨酸的羟基构成的酸性作用点和一个由组氨酸咪唑环构成的碱性作用点，两者通过氢键结合，增强了丝氨酸羟基的亲核活性，使之易于与乙酰胆碱结合

胆碱酯酶水解乙酰胆碱的过程可分为三个步骤：①乙酰胆碱分子结构中带正电荷的季铵阳离子头，以静电引力与胆碱酯酶的阴离子部位相结合；同时乙酰胆碱分子中的羰基碳与胆碱酯酶酯解部位的丝氨酸的羟基以共价键形式结合，形成乙酰胆碱和胆碱酯酶的复合物。②乙酰胆碱与胆碱酯酶复合物裂解成胆碱和乙酰化胆碱酯酶。③乙酰化胆碱酯酶迅速水解，分离出乙酸，酶的活性恢复。

胆碱酯酶活性测定方法

1. 利用酶促反应产生的色素变化测定

(1) 比色法：将胆碱酯酶底物乙酰胆碱与碱性溴化镉等试剂反应，生成黄色产物，利用比色计或分光光度计测定产物的吸光度，间接测定胆碱酯酶活性。 

(2) 荧光法：将胆碱酯酶底物与荧光染料反应，使底物和产物之间发生荧光变化，利用荧光光谱仪测定荧光强度，间接测定胆碱酯酶活性。 

2. 利用电化学方法测定

常用的是反应器中使用碳电极或银电极，利用底物和产物之间的电位差变化测定胆碱酯酶活性。 

3. 利用放射性同位素标记测定

将底物或产物标记上放射性同位素，通过测定放射性同位素的放射性强度，间接测定胆碱酯酶活性。 

4. 利用质谱法测定

将底物和产物分离并通过质谱仪测定其质荷比，间接测定胆碱酯酶活性。 

检测标准

1、NY/T 1157-2006 农药残留检测专用丁酰胆碱酯酶

2、ARMY MIL-D-51503 VALID NOTICE 2-2004 机票探测器.鳗鱼酶抗胆碱酯酶剂

3、T/CAIA SHO19-2022 乙酰胆碱酯酶 活性检测 分光光度法

4、GB/T 26348-2010 蚊虫抗药性检测方法 不敏感乙酰胆碱酯酶法

5、T/CSTM 01090-2022 乙酰胆碱酯酶 活性检测 分光光度法

6、GB/T 26349-2010 蝇类抗药性检测方法 家蝇不敏感乙酰胆碱酯酶法

7、GB/T 26351-2010 蜚蠊抗药性检测方法 德国小蠊不敏感乙酰胆碱酯酶法

8、WS/T 594-2018 蝇类抗药性检测方法 家蝇 不敏感乙酰胆碱酯酶等位基因检测法

9、GB 26351-2010 蜚蠊抗药性检测方法、德国小蠊不敏感乙酰胆碱酯酶法

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