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脱氢酶活性测定,细胞毒性检测

在酶学分类中属于第 一大类。反应中被氧化的底物叫氢供体或电子供体,被还原的底物叫氢受体或电子受体。当受体是O2时,催化该反应的酶称为氧化酶,其他情况下都称为脱氢酶。不同的脱氢酶几乎都根据其底物的名称命名。如琥珀酸脱氢酶催化的反应。

这个反应是可逆的,在一定条件下,这个反应平衡趋向左方,那么这个酶可称为反丁烯二酸还原酶。有时也可以由于产物的特殊重要性而以产物来命名,例如可的松还原酶等。

脱氢酶是已知酶中种类较多的一类,其中以催化供体中醇基团(—CHOH)、醛、酮基团(—HCO或—RCO)及烷基因(—CH2—CH2—)脱氢的常见。天然受体主要有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)和细胞色素。


脱氢酶的反应原理

大多数脱氢酶的天然受体是NAD+或NADP+〔以下用NAD(P)+表示〕,例如苹果酸脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶等 。脱氢酶的底物经这类脱氢酶的催化使NAD(P)+还原生成NAD(P)H。另一些脱氢酶以黄素为辅基,辅基在催化反应中进行氧化还原。例如琥珀酸脱氢酶,还原型烟酰胺腺嘌岭二核苷酸(NADH)脱氢酶,胆碱脱氢酶等。NADH以及一些直接以黄素为辅基的脱氢酶的底物通过脱氢酶的催化之后通过细胞色素系统而被氧氧化,此时释放出的能量供机体需要。α-甘油磷酸,胆碱等可以分别通过相应的脱氢酶,在相当于琥珀酸脱氢酶的位置与电子传递链连接。

NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶都含有黄素辅基。NADH脱氢酶的辅基是黄素单核苷酸(FMN),以非共价键与酶蛋白结合。琥珀酸脱氢酶的辅基是黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),以共价键与酶蛋白的组氨酸结合。

NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶均含有非血红素铁和酸不稳定硫。利用顺磁共振了解了铁硫部分在电子传递过程中的氧化还原作用,以及它们在酶与膜结合过程中的作用,铁硫中心不稳定,往往是酶失活的原因,铁硫中心也是一些酶抑制剂的作用部位。

生物体中绝大多数氧化还原反应都是在脱氢酶及氧化酶的催化下进行。物质经脱氢酶催化氧化,之后通过电子传递链而被氧氧化,此时通过氧化磷酸化作用生成腺苷三磷酸(ATP),是异养生物体取得能量的主要途径。


关于脱氢酶,北京清析技术研究院可提供活性测定、km值测定、含量测定、吸光度测定、漏出率测定、比活力测定、细胞毒性测定、波长测定等检测项目。同时,北京清析技术研究院可对苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、NADH脱氢酶、乳酸脱氢酶、乙醛脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、磷酸脱氢酶等进行检测。


脱氢酶检测标准举例

1、YY/T 1241-2014 乳酸脱氢酶测定试剂(盒)

2、YY/T 1242-2014 α-羟丁酸脱氢酶测定试剂(盒)

3、DB34/T 1729-2012 窖泥中脱氢酶活性的分析方法

4、WS/T 361-2011 乳酸脱氢酶催化活性浓度测定参考方法 

5、BS EN ISO 23753-2:2011 土壤质量.土壤中的脱氢酶活性测定.氯化四氮唑法(INT)

6、DB22/T 3164-2020 0~3天新生儿血清乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶MB参考区间

7、KS I ISO 23753-2-2006(2016 土壤质量土壤脱氢酶活性的测定第2部分:氯化碘三唑法

8、WS/T 404.7-2015 临床常用生化检验项目参考区间 第7部分:血清乳酸脱氢酶、肌酸激酶

9、BS EN ISO 18187:2018 土壤质量 利用球形节杆菌脱氢酶活性进行固体样品接触测试


以上就是关于脱氢酶检测的介绍,北京清析技术研究院提供分析、检测、测试、鉴定、研发等技术服务,已获得CMA、CNAS等资质证书。总院位于北京,在上海、广州、深圳、合肥、南京、成都、武汉等地区设立27家分院,工程师一对一咨询,寄样或上门任您选择,为您提供便利的检测服务。

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