胰蛋白酶含量检测，第三方抑制因子测定机构，cma资质

胰蛋白酶是从牛、猪、羊的胰脏提取，纯化获得的结晶，再制成的冻干制剂。易溶于水，不溶于三氯甲烷、乙醇等有机溶剂。在pH1.8时，短时间煮沸几乎不失活；在碱溶液中加热则变性沉淀，Ca2+有保护和激活作用，胰蛋白酶的等电点为pH10.1。

牛胰蛋白酶原有229个氨基酸组成，含6对二硫键，其氨基酸排列顺序和晶体结构已被阐明。在肠激酶活自身催化下，酶原的N末端赖氨酸与异亮氨酸残基之间的肽键被水解，释放出来缬-天-天-天-天-赖6肽，生成有活性的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个，分子量23800，活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。

猪胰蛋白酶的化学结构与牛胰蛋白酶十分相似，在氨基酸残基排列顺序中，只有41个氨基酸残基不同，但分子构型有很大区别。沉降系数S20W为2.77S，pI=10.8，热稳定性较牛胰蛋白酶稳定，Ca2+对酶的保护作用不及牛羊的明显，无螯合Ca2+的中心部位。有6对二硫键，断裂1~2个键，均不至于破坏酶分子的完整结构而保护了酶的活性。酶的活力分别相当于牛的72%及羊的61%。

胰蛋白酶专一作用有碱性氨基酸精氨酸及赖氨酸羧基所组成的肽键。酶本身很容易自溶，由原先的β-胰蛋白酶酶转化为α-胰蛋白酶，再进一步降解为拟胰蛋白酶，乃至碎片，活力也逐步下降而丧失。

关于胰蛋白酶，北京清析技术研究院可提供密度、沸点、折射率、熔点、水溶性、活性测定、含量测定、定性定量分析、外观、抑制因子测定、性状、生物活性、酸度、溶液澄清度、干燥失重等检测项目。同时，北京清析技术研究院可对胰蛋白酶抑制剂等进行检测。

胰蛋白酶含量测定方法

照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定底物溶液制成后应在2小时内使用。取N-苯甲酰L精氨酸乙酯盐酸盐85.7mg，加水溶解使成100ml，作为底物原液；取10ml，用磷酸盐缓冲液(取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液13ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液87ml混合，pH值为7.6)稀释成100ml，恒温于25.0℃±0.5℃，以水作空白，在253mm的波长处测定吸光度，必要时可用上述底物原液或磷酸盐缓冲液调节，使吸光度在0.575~0.585之间供试品溶液取本品适量，精密称定，加0.001mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含50~60胰蛋白酶单位的溶液。测定法取底物溶液3.0ml，加0.001mol/L盐酸溶液200μl，混匀，作为空白。另精密量取供试品溶液2004，加底物溶液(恒温于25.0℃±0.5℃)3.0ml，立即计时，混匀，使比色池内的温度保持在25.0℃士0.5℃，在253nm的波长处，每隔30秒读取吸光度，共5分钟。以吸光度为纵坐标，时间为横坐标，作图；每30秒吸光度的改变应恒定在0.015~0.018之间，呈线性关系的时间不得少于3分钟。若不符合上述要求，应调整供试品溶液的浓度，再作测定。在上述吸光度对时间的关系图中，取成直线部分的吸光度，按下式计算。P 0.003TW 式中P为每1mg供试品中含胰蛋白酶的量，单位；A1为直线上终止的吸光度；A2为直线上开始的吸光度；T为A1至A2读数的时间，分钟；W为测定液中含供试品的量，mg；0.003为在上述条件下，吸光度每分钟改变0.003，即相当于1个胰蛋白酶单位。

胰蛋白酶检测标准

1、JIS K 0605:2000 蛋白质.胰蛋白酶.定量分析方法

2、JIS K 0605:1992 胰蛋白酶定量分析的方法

3、KS J 4205-2008 备用胰蛋白酶的定量分析方法

4、KS J 4205-2023 固定化胰蛋白酶的定量分析方法

5、GB/T 21498-2008 大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定

6、DIN EN ISO 14902:2022-08 动物饲料-大豆产品胰蛋白酶抑制剂活性的测定

7、GB/T 40368-2021 植物代谢产物胰蛋白酶抑制因子测定 酶联免疫吸附法

8、GB 5009.224-2016 食品安全国家标准 大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定

以上就是关于胰蛋白酶检测的介绍，北京清析技术研究院提供分析、检测、测试、鉴定、研发等技术服务，已获得CMA、CNAS等资质证书。总院位于北京，在上海、广州、深圳、合肥、南京、成都、武汉等地区设立27家分院，工程师一对一咨询，寄样或上门任您选择，为您提供便利的检测服务。