体内微核试验,微核试验CMA机构
| 更新时间 2024-12-03 08:00:00 价格 请来电询价 联系电话 19355561601 联系手机 19355561601 联系人 肖工 立即询价 |
微核试验是检测染色体或有丝分裂器损伤的一种遗传毒性试验方法。无着丝粒的染色体片段或因纺锤体受损而丢失的整个染色体,在细胞分裂后期仍留在子细胞的胞质内成为微核。常用的是啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验。以受试物处理啮齿类动物,然后处死,取骨髓,制片、固定、染色,于显微镜下计数PCE中的微核。如果与对照组比较,处理组PCE微核率有统计学意义的增加,并有剂量-反应关系,则可认为该受试物是哺乳动物体细胞的致突变物。人外周淋巴细胞微核试验,可用于接触环境致突变物的人群的监测和危险性评价。
种类
1、常规微核试验
利用细胞生物学方法经显微制片后在显微镜下直接计数待测材料微核率的方法。这是普遍采用的基本方法,可以分为两类:
1)将微核试验材料,在加人待测物质的环境中培养一段时间,染色制片,显微观察计算微核率。
2)直接将受遗传毒理损害生物的相应材料制片,显微观察计算微核率。
2、荧光原位杂交试验与DNA探针
荧光原位杂交(Flu-orescenceinsituhybridization,FISH)技术是近年来开展起来的分子生物学新技术。它是使用生物荧光素标记的各类DNA和RNA探针与细胞或组织在玻片上进行原位杂交,被观察的特定DNA片段(或序列)在荧光显微镜下固定在细胞核或染色体的原有部位显示荧光。利用荧光原位杂交试验可以检测是染色体断裂还是染色体丢失,以及可以判断是哪一条染色体,那一段所产生的微核。目前已成功用于MN实验的DNA探针主要有两类:
第 一类:是含DNA重复序列的探针,主要用于检测染色体着丝粒的DNA。
第二类:是含染色体端粒DNA序列的探针,它主要显示染色体臂的存在。
关于微核试验,北京清析技术研究院可提供小鼠微核试验、骨髓微核试验、体内微核试验、大鼠微核试验、细胞微核试验、植物微核试验、遗传微核试验、药物微核试验等检测项目。同时,北京清析技术研究院可对常规微核试验、细胞分裂阻滞微核分析法、荧光原位杂交试验与DNA探针与抗着丝粒抗体染色等进行微核试验。
试验方法
1、动物体内细胞微核:主要有骨髓嗜多染红细胞微核试验;外周血淋巴细胞微核试验。
2、细胞培养微核试验;
3、蚕豆根尖微核试验:实验所用的蚕豆为松滋青皮豆,通过浸种、催芽、染毒、恢复培养、固定、孚尔根染色等步骤后,进行镜检。
试验标准
1、GB/T 21773-2008 化学品.体内哺乳动物红细胞微核试验方法
2、GB/T 28646-2012 化学品.体外哺乳动物细胞微核试验方法
3、HJ 1016-2019 水质 致突变性的鉴别蚕豆根尖微核试验法
4、GB 15193.5-2014 食品安全国家标准 哺乳动物红细胞微核试验
5、GB 15193.28-2020 食品安全国家标准 体外哺乳类细胞微核试验
6、YY/T 0870.6-2019 医疗器械遗传毒性试验 第6部分:体外哺乳动物细胞微核试验
7、DIN ISO 29200 E:2012-06 土质 高等植物遗传毒性效应的评估 蚕豆微核试验
8、DB22/T 396.7-2017 保健用品毒理学评价程序与检验方法 第7部分:啮齿动物微核试验
9、UNI EN ISO 29200:2020 土壤质量 对高等植物遗传毒性影响的评估 蚕豆微核试验
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