凯氏定氮检测机构，凯氏定氮法检测

凯氏定氮是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

关于凯氏定氮，北京清析技术研究院可提供凯氏定氮法蛋白质含量测定，凯氏定氮粗蛋白测定，凯氏定氮土壤铵态氮测定，凯氏定氮挥发性盐基氮测定，凯氏定氮可溶性蛋白质测定，凯氏定氮乳制品蛋白质测定等检测项目。

凯氏定氮法

1）试剂

1.1 硫酸铜。 1.2 硫酸钾。 1.3 硫酸。 1.4 1%硼酸溶液。 1.5 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 1.6 30%氢氧化钠溶液。 1.7 0.025mol/L硫酸标准溶液或0.05mol/L盐酸标准溶液。

2）仪器

1.安全管 2.导管 3.汽水分离管 4.样品入口 5.塞子 6.直形冷凝管 7.吸收瓶 8.隔热液套 9.反应管 10.蒸汽发生瓶

3）操作

1、样品处理：精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品（约相当氮30-40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及20毫升硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5小时。取下放冷，小心加20ml水，放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸同一方法做试剂空白试验。但是此法比较危险，不易在实验室演示，大多数实验室有消煮仪一次可以进行多个（一次可以消煮16个样品）样品处理，并有通风橱进行通风，温度可以自己设定，更加安全和可操作性，因此逐步成为主要的凯氏定氮法的处理方法。

2、装好定氮装置，于水蒸气发生器内装水约2/3处加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。

3、向接收瓶内加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示剂1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml样品消化液由小玻璃杯流入反应室，并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其缓慢流入反应室，不能立即将玻璃盖塞紧，这样易使玻璃塞粘在进样口，应先用蒸馏水冲洗然后再盖，并加水于小玻璃杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏，蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏5min。移动接收瓶，使冷凝管下端离开液皿，再蒸馏1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.05N硫酸或0.05N盐酸标准溶液定至灰色或蓝紫色为终点。

4、计算

X={[（V1-V2）*N*0.014]/（m*10）}*F*10 0%

X：样品中蛋白质的百分含量，g； V1：样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml； V2：试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积，ml； N：硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度； 0.014：1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数； m：样品的质量（体积），g（ml）； F：氮换算为蛋白质的系数。

检测标准

1、GB/T 33862-2017 全(半)自动凯氏定氮仪

1、T/QAS 071-2021 卤水 总氮的测定 凯氏定氮法

3、KS E ISO 333-2018 煤 氮的测定 半微量凯氏定氮法

4、DB64/T 1734-2020 土壤水解性氮的测定 凯氏定氮仪法

5、T/NAIA 001-2020 发酵饲料中氨态氮的测定 凯氏定氮法

6、T/NAIA 044-2021 家畜中尿液总氮的测定 凯氏定氮法

7、GOST 34111-2017 果汁产品 凯氏定氮法测定氮含量

8、KS I ISO 11261-2021 土壤质量 全氮的测定 改良凯氏定氮法

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