凝集素效价检测,凝集素检测机构实验室
| 更新时间 2024-11-30 08:00:00 价格 请来电询价 联系电话 19355561601 联系手机 19355561601 联系人 肖工 立即询价 |
凝集素(Lectin)是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白,因其能凝集红血球(含血型物质),故名凝集素。常用的为植物凝集素(Phytoagglutin,PHA),通常以其被提取的植物命名,如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheat germ agglutinin,WGA)、花生凝集素(Peanut agglutinin,PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin,SBA)等,凝集素是它们的总称。
应用
一般认为细胞膜上特定的糖基可用以区别细胞的类型和反映细胞在分化、成熟和肿瘤细胞性变中的变化。仅在某些特殊的例子,其细胞结合凝集素的性能可以预先估计,如双花扁豆素之于血型A物质的特异性,荆豆凝集素之于血型O物质2—L—岩藻糖的特异性,然而在绝大多数情况下,关于由凝集素所识别的碳水化合物决定簇的种类,关于携带决定簇的分子的性质和机能,完全凭实验经验去发现。
分类
凝集素可按糖的特异性、分子结构、结合位点和其功能进行分类。动物凝集素按分子结构分为C-型凝集素、S-型凝集素、P-型凝集素、I-型凝集素和正五聚蛋白(Pentraxins)。C-型凝集素是Ca2+依赖的凝集素;S-型凝集素是特异性识别β-半乳糖苷键的凝集素;P-型凝集素是特异性识别6磷酸甘露糖的凝集素;I-型凝集素是类似免疫球蛋白的凝集素;正五聚蛋白(Pentraxins)是有五个亚基的凝集素。
关于凝集素,北京清析技术研究院可提供凝集素含量、凝集素基因型、转录水平测定、氨基酸序列分析、分子结构测定、溶解性测定、免疫原性检测、活性测定、效价测定、相对分子质量测定、凝乳形成系数测定、毒性检测、滴度测定、水分含量测定、染色体组型分析、酸碱度检测、纯度测定、电泳分析、结晶形态观测、形态学分析、活性检测、定量检测等检测项目。同时,北京清析技术研究院可对大豆凝集素、植物凝集素、半乳糖凝集素、花生凝集素、蓖麻凝集素、麦胚凝集素、外源凝集素、细胞凝集素、扁豆凝集素等进行检测。
凝集素效价检测步骤
(1)倍比稀释:向“V”型血凝板个孔中加入20μLPBS 缓冲液,然后分别吸取样品纯化试液20μL 加入到“V”型血凝板的第 一孔,混合后取出20μL 加入到第二孔,混合后亦取出20μL加入到第三孔,以此类推作倍比稀释。微微摇动血凝板使其混匀。每孔加入20μL2%血球悬液,血球悬液加毕后继续摇动1min ,血凝板在室温置放2h。用肉眼观察凝集反应情况,记录凝集程度。(n=5)
(2)将凝集程度分为5个等级,从低到高分别以0、1、2、3、4 表示。
4:红细胞完全凝集,呈一层薄膜片状,均匀地分布在整个孔中,且边缘不整齐。
3:红细胞大部分凝集,但不成膜状,周边有较窄的透明带,且有未凝集的红细胞沉淀于孔底成红色小圆点状。
2:红细胞部分凝集,周边有较宽的透明带,且有未凝集的红细胞沉淀于孔底成红色圆点状,且相当于空白对照组的50%。
1:红细胞大部分不凝集,有可见凝集颗粒,未凝集的红细胞沉淀于孔底成红色圆形状。
0:红细胞完全不凝集,全部沉淀于孔底成大的圆形状,与空白对照组完全相同。
(3)血凝效价判断:以能使50%红细胞凝集的血凝素的稀释倍数作为血凝效价,即上述表示为“2”的凝集程度所对应的稀释倍数。
(4)样品凝集素含量计算公式:
C=S0 *f*V/(f0 *W)*10 0%
式中S0 为标准样品的浓度,f为待测样品的凝集效价(如2的多少次方),V为待测样品溶液的体积(ml),f0 为标准样品的凝集效价,W为待测样品质量。
检测标准
1、GB/T 40220-2021 植物代谢产物大豆凝集素测定 酶联免疫吸附法
2、农业农村部公告第628号-13-2022 转基因生物及其产品食用安全检测 抗营养因子 大豆中凝集素检测方法
以上就是关于凝集素检测的介绍,北京清析技术研究院提供分析、检测、测试、鉴定、研发等技术服务,已获得CMA、CNAS等资质证书。总院位于北京,在上海、广州、深圳、合肥、南京、成都、武汉等地区设立27家分院,工程师一对一咨询,寄样或上门任您选择,为您提供便利的检测服务。