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单位新闻
工具酶活力测定,失活温度检测,cma资质
发布时间: 2024-03-25 18:03 更新时间: 2024-04-28 08:00

基因工程的关键技术是脱氧核糖核酸的连接和重组,在此过程中一些酶起着至关重要的作用,这些酶统称为基因工程工具酶。工具酶种类繁多、功能各异,主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类。其中,以限制性核酸内切酶和DNA连接酶在分子克隆中的作用突出。这些酶具有特异性的序列识别能力以及高效的生物催化活性,在一定的条件下可以对核酸分子进行切割、连接、扩增以及修饰等,同时工具酶的反应条件温和且具有出色的生物相容性。基于这些优势,工具酶被广泛地应用于核酸、蛋白质和小分子等生物活性分子的分析检测。


分类

1、DNA限制性内切酶

生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶(简称限制酶)

2、连接酶

它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。

3、聚合酶

又称DNA聚合酶。系专司生物催化合成脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的一类酶的统称。

4、核酸酶

核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等,可水解相应的DNA和RNA,核酸酶S1可降解单链DNA和RNA,用量增大也可降解双链核酸。它可用于切去ds-cDNA合成中产生的发夹环。


关于工具酶,北京清析技术研究院可提供酶活性测定,代谢物测定,失活温度测定,活力测定,稳定性测定等检测项目。同时,北京清析技术研究院可对细胞工具酶,载体工具酶,生物工具酶,基因表达工具酶,分子生物学工具酶,内切酶,限制酶,聚合酶,连接酶,修饰酶,核酸酶等进行检测。


检测方法

1. 活性测定法

酶的活性是指每单位时间内酶所催化的反应物的转化量。通过活性测定法可以测定酶的活性,常用的方法包括比色法、荧光法、放射性测定法等。     

2. 蛋白含量测定法

酶是一种蛋白质,因此可以通过测定酶的蛋白含量来间接测定酶的含量。常用的蛋白含量测定方法包括比色法、光度法等。     

3. SDS-PAGE电泳法

该方法利用SDS-PAGE电泳将酶分离出来,然后通过染色等方法测定酶的含量。     

4. 免疫学方法

该方法利用酶的抗原性质,通过抗体结合酶来测定酶的含量或活性。常用的方法包括ELISA等。


检测标准

1、GB/T 36390-2018 工具酶 溶菌酶

2、GB/T 36760-2018 工具酶术语和分类

3、GB/T 40174-2021 工具酶纯度的检测方法

4、GB/T 36756-2018 工具酶活性测定通用要求


以上就是关于工具酶检测的介绍,北京清析技术研究院提供分析、检测、测试、鉴定、研发等技术服务,已获得CMA、CNAS等资质证书。总院位于北京,在上海、广州、深圳、合肥、南京、成都、武汉等地区设立27家分院,工程师一对一咨询,寄样或上门任您选择,为您提供便利的检测服务。

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