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粗多糖含量测定,平均分子量检测

更新时间
2024-09-08 08:00:00
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详细介绍

粗多糖是指复合型杂多糖,主要有黏多糖、脂多糖、结合多糖(糖蛋白及黏蛋白)等。随着科技的发展,粗多糖的保健功能越来越引起人们的重视。一般是从大豆籽粒中提取出的可溶性寡糖的总称,大豆中的寡糖属于а-半乳糖苷类,包括棉籽糖、水苏糖和Vabascose。


提取方法

先用体积分数80%的乙醇处理原料以除去单糖、低聚糖、苷类、生物碱及蛋白等物质,再用传统的水提工艺浸提多糖,通过单因素试验和正交试验确定较优的鲜山药多糖水提醇沉工艺条件,并对精制的山药多糖进行初步鉴定,又用改良的苯酚-硫酸法测定了多糖含量。


关于粗多糖,北京清析技术研究院可提供总多糖含量、硫酸含量、酸度、平均分子量、单糖组成分析、分枝度、分子式、分子量、溶解度、PH值、粘度、蛋白质含量、灰分含量、水分含量、色泽、细胞壁碳水化合物含量、游离多糖含量、碱处理多糖含量、毒素含量、微生物检测等检测项目。同时,北京清析技术研究院可对茯苓粗多糖,食用菌粗多糖,保健食品粗多糖,灵芝孢子粉粗多糖,枸杞粗多糖,阿胶粗多糖,保健酒粗多糖,口服液粗多糖,锁阳粗多糖,黄连粗多糖,佛手瓜粗多糖,出口植物源食品粗多糖,螺旋藻粗多糖,白鲜皮粗多糖等进行检测。


检测方法

1. 原理

分子量大于10,000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后,加入碱性铜试剂,选择性地从其他高分子物质中沉淀出葡聚糖,沉淀部分与苯酚-H2SO4反应,生成有色物质,在485nm条件下,有色物质的吸光度值与葡聚糖浓度成正比。

2. 适用范围

参照AOAC方法。适用于检测含有分子量大于10,000道尔顿葡聚糖的样品。

3. 操作方法

3.1 样品处理

(1) 样品提取:称取样品1~5g,加水100ml,沸水浴加热2h,冷却至室温,定容至200ml(V1),混匀后过滤,弃初滤液,收集余下滤液。

(2) 沉淀高分子物质:准确吸取上述滤液100ml(V2),置于烧杯中,加热浓缩至10ml,冷却后,加入无水乙醇40ml,将溶液转至离心管中以3000rpm离心5min,弃上清液,残渣用80%乙醇洗涤3次,残渣供沉淀葡聚糖之用。

(3) 沉淀葡聚糖:上述残渣用水溶解,并定容至50ml (V3),混匀后过滤,弃初始滤液后,取滤液2.0ml(V4),加入2.5mol/L NaOH2.0ml,Cu应用溶液2.0ml,沸水浴中煮沸2mim,冷却后以3000rpm离心5min,弃上清液,残渣用洗涤液洗涤3次,残渣供测定葡聚糖之用。

(4) 测定葡聚糖:上述残渣用2.0mL 1.8mol/LH2SO4溶解,用水定容至100mL(V5)。准确吸取2.0ml(V6),置于25ml比色管中,加入1.0ml苯酚溶液,10ml浓硫酸,沸水浴煮沸2分钟,冷却比色。从标准曲线上查得相应含量,计算粗多糖含量。

3.2 标准曲线制备:

精密吸取葡聚糖标准应用液0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.50,2.00ml(分别相当于葡聚糖0.01,0.02,0.04,0.06,0.08,0.10,0.15,0.20mg),补充水至2.0mL,加入苯酚溶液1.0ml,浓硫酸10ml,混匀,沸水浴2分钟,混匀,沸水浴2分钟,冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比,测定吸光度值(A),以葡聚糖浓度为横坐标,A为纵坐标绘制标准曲线。

4.计算

从标准曲线上查得样品相应含量,计算粗多糖含量。


检测标准

1、NY/T 1676-2008 食用菌中粗多糖含量的测定

2、NY/T 1676-2023 食用菌中粗多糖的测定 分光光度法

3、SN/T 4260-2015 出口植物源食品中粗多糖的测定 苯酚-硫酸法


以上就是关于粗多糖检测的介绍,北京清析技术研究院提供分析、检测、测试、鉴定、研发等技术服务,已获得CMA、CNAS等资质证书。总院位于北京,在上海、广州、深圳、合肥、南京、成都、武汉等地区设立27家分院,工程师一对一咨询,寄样或上门任您选择,为您提供便利的检测服务。

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